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角膜移植后患者角膜新生淋巴管与新生血管和炎症的关联

作者:时间:2011-03-04 13:40:56 来源:www.ksfbw.com 阅读次数:876次 ]

【摘要】目的：研究角膜移植后角膜新生淋巴管与新生血管和炎症的关联。方法：人角膜取自行二次角膜移植的患者19例。淋巴内皮细胞受体(lymphatic vessel endothelial hyaluronan receptor, LYVE1)和内皮细胞黏附因子1(platelet endothelial cell adhesion modecule1, PECAM1)双重免疫组化法标记角膜中的新生血管和淋巴管，进行淋巴管计数(lymphatic vessels counting, LVC)和血管计数(blood vessels counting, BVC)，比较BVC、炎症指数(inflammation index，IF)、移植历史(transplantation history, TH)与LVC之间的关联。结果：角膜移植后BVC，IF与LVC间均呈显著性正相关，而TH与LVC间呈显著性负相关。角膜移植后新生淋巴管、血管、眼表炎症间大致成平行发展，新生淋巴管最先退化，其次是眼表炎症，新生血管最后消退。结论：人角膜移植后角膜新生淋巴管与新生血管、眼表炎症之间存在着极为密切的关联。

【关键词】角膜移植;新生淋巴管;新生血管;炎症农业论文发表

　　AbstractAIM: To discuss the association of corneal hemangiogenesis, corneal inflammation with corneal lymphangiogenesis after human corneal transplantation.METHODS: Nineteen human corneas were obtained from 19 patients undergoing a second corneal transplantation from 2005 to 2008. Corneal hemangiogenesis and lymphangiogenesis were examined by lymphatic vessel endothelial hyaluroman receptor (LYVE1) and platelet endothelial cell adhesion modecule1 (PECAM1) double immunohistochemistry. The state of corneal inflammation was eva luated by inflammation index (IF) grading. Then, the association of blood vessel counting (BVC), IF, corneal transplantation history (TH) with lymphatic vessel counting (LVC) was examined.RESULTS: LVC was strongly and positively correlated with both BVC(r=0.725;P<0.01) and IF(r=0.661; P<0.01) in transplanted human corneas. However, LVC was significantly and inversely correlated with TH(r=0.301; P<0.01). Although the development of corneal lymphangiogenesis, hemangiogenesis and inflammation was parallel in general, corneal lymphangiogenesis disappeared followed by the inflammation of corneas and corneal blood vessels.CONCLUSION: Corneal lymphangiogenesis correlates closely with corneal hemangiogenesis and inflammation after human corneal transplantation.

　　KEYWORDS: corneal transplantation; lymphangiogenesis; hemangiogenesis; inflammation

　0引言农业论文发表

　　角膜移植后存在着角膜新生淋巴管[1]。新生淋巴管可以加速角膜的抗原呈递，破坏角膜的免疫赦免，从而加快免疫应答的发生[2]。角膜新生淋巴管有望成为抗移植排斥反应的新靶点。然而，目前对人角膜淋巴管的研究只限于通过钻取角膜，组织切片后行电镜检查或组化染色标记后在显微镜下观察，而无法在活体上观察角膜新生淋巴管的生长情况，评估抗淋巴管治疗的疗效，极大地限制了该领域的发展。近年研究发现，在血管化角膜中，角膜新生血管和淋巴管呈平行发展[3];而Mouta等[4]的研究认为炎症对角膜新生淋巴管的形成至关重要。既然角膜新生淋巴管和新生血管、炎症之间可能存在着一定的联系，而表1 再次角膜移植患者的情况±s(range)

　　原发病nIFTH病毒性角膜炎40.44±0.24(0.22～0.78)4.2±2.9(1.1～8.0)角膜变性40.44±0.24(0.11～0.67)3.6±1.6(1.3～4.1)眼外伤40.55±0.29(0.22～0.89)3.3±2.5(0.8～6.5)圆锥角膜40.39±0.22(0.11～0.56)3.9±2.6(1.5～7.0)大泡性角膜病变30.44±0.30(0.22～0.78)3.8±2.3(1.6～6.2)

　　图1 LYVE1 和PECAM1免疫组化法标记人角膜中的新生血管和淋巴管(SABC×200) A1～A3：病毒性角膜炎移植史1.3a，角膜中无明显的炎症征象和淋巴管新生征象，但出现了角膜新生血管;B1～B3：病毒性角膜炎移植史1.6a，角膜中存在着大量的炎性细胞浸润，且在出现了角膜新生血管的同时，出现了角膜新生淋巴管。

　　后两者又极易通过裂隙灯观察，我们能否通过检测其与角膜新生淋巴管间的关联，从而间接评估角膜移植后的角膜新生淋巴管呢?目前有关这方面的研究国内外均未见报道。

　　1对象和方法农业论文发表

　　1.1对象病变角膜来自2005年在中山大学中山眼科中心行二次角膜移植的患者19例。所有患者在首次角膜移植前均未出现角膜新生血管。角膜移植史<1a者1例，1～2a者6例，2～5a者8例，>5a者4例(表1)。每个患者均被告知试验程序并签署知情同意书，所有程序均遵循Helsinki原则。正常对照为拟用于角膜移植的3只正常供体角膜。

　　1.2方法钻取角膜组织后，快速沿直径方向从鼻侧向颞侧分成两半，40g/L中性甲醛液中固定24h，制备角膜蜡块后，作4μm厚连续切片，每个蜡块切40张，采用SABC法进行染色，一抗分别为小鼠抗人LYVE1、mAb小鼠抗人PECAM1 mAb(R&D systems, MN,USA)，二抗为生物素化兔抗小鼠IgG，DAB显色，苏木素复染，显微镜下观察，棕褐色管腔者为阳性。PECAM1(+)LYVE1()的管腔为角膜新生血管，而PECAM1(+)LYVE1(+)的管腔为角膜新生淋巴管。LVC和BVC为所有切片中的数目总和后

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