松树皮中原花青素的提取及抗氧化作用研究

作者:孔德冰时间:2019-08-20 15:42:04  来源:  阅读次数:42次 ]
松树皮,分布极广种类多,多数生长于我国的东北及华北地区,含有 40 种有效成分,其中以水溶性极高的原花青素居多。近年来随着人们对黄酮类活性物质的研究加深,松树皮的研究也愈来愈多,其高含量的抗氧化活性物质使松树皮提取物具有得天独厚的优势,其中抗氧化活性物质可应用于诸如化妆品、食品等多个领域。 松树皮药用价值高,具有散热解暑,温中止血,回阳通脉,燥湿消痰的功效。
一、材料与方法
(一)原材料
松树皮,购于淘宝,产地吉林长白山,无虫害、无糜烂;猪油,购于泽航家农产品,正常肥猪肉煎制,不含任何添加剂;胡姬花牌花生油,购于康乐购超市,产地山东青岛。
(二)试验方法
1.工艺流程
新鲜树皮→预处理→超声波乙醇浸提→过滤→2 次浸提→合并滤液→减压浓缩→色素浓缩液→测定吸光度→计算提取量2.原花青素的提取
取一定量的松树皮,切成小块,在 55℃下烘干过夜后将干松树皮片磨成粉末,粉末用 60 目筛过筛备用。
称取 2g 粉末,置于 250mL 锥形瓶中,按一定量的料液比加入提取剂(盐酸:乙醇(V:V)=1:9,盐酸为 2M),超声波作用一定时间后,在一定水浴温度下提取一定的时间,之后按提取流程进行吸光度测定。
原花青素提取量(mg/g)=1000AV/abm。 其中:A 为吸光度;V 为浓缩液的体积;a 为原花青素的吸光系数(0.0775L/(g.cm));b 为液层厚度(1cm);m 为样品质量。
3.猪油和花生油过氧化值的检测
在 50g 猪油和花生油中分别加入 1%的松树皮原花青素浓缩液,充分摇匀,对照组不加浓缩液,置于室温下,分别于第 0d,第 3d,第6d,第 9d,第 12d 测量猪油和花生油的过氧化值,并进行空白检测。 过氧化值检测方法如下:精密称取油脂 2-3g 并注入 250mL 锥形瓶中,水浴中加热溶解,加入氯仿 - 冰乙酸混合物 30mL,立即震荡并溶解。 加入饱和碘化钾 1mL,在暗处放置 3min,取出后加水 5mL,摇匀后立即用 0.005M 硫代硫酸钠进行滴定至淡黄色,加淀粉指示剂 1mL,继续滴定至蓝色消失为止,记录使用的硫代硫酸钠的体积为 V 1 ,同时做不加油脂的空白试验记录使用的硫代硫酸钠体积为 V 2 ,平行三次试验。
过氧化值的计算:n POV=(V 1 -V 2 )×0.005×0.1269/m×100n n n n 式中:V 1 - 三次试验中消耗硫代硫酸钠的平均值;V 2 - 三次试验中空白对照消耗硫代硫酸钠的平均值;0.005- 硫代硫酸钠的浓度;0.1269- 消耗 1mL 硫代硫酸钠相当、于碘的量;m- 试样质量。
(三)单因素试验
通过对乙醇提取原花青素工艺的研究,以原花青素提取量为评价标准,进行单因素试验,对超声波作用时间、料液比、提取温度和提取时间四个因素对原花青素提取量的影响进行研究。
1.超声波作用时间对提取量的影响
采用超声波作用时间为 5min、10n min、15n min、20n min、25n min 共5 个时间。 按 1:15 加入提取剂,55℃水浴中提取 2h,抽滤后滤渣进行 2次浸提滤渣,合并滤液,减压浓缩得到较为纯净的原花青素。以提取量为评价指标进行评定。
2.料液比对提取量的影响
分别按照料液比为 1:10、1:15、1:20、1:25、1:30 的比例加入提取剂,选用最佳超声波作用时间,55℃水浴中提取 2h,抽滤后滤渣进行 2次浸提,合并滤液,减压浓缩得到较为纯净的原花青素。以提取量为评价指标进行评定。
3.提取温度对提取量的影响
采用提取温度(水浴温度)45℃、50℃、55℃、60℃和 65℃,最佳超声波作用时间和最佳料液比进行试验,水浴中提取 2h,抽滤后滤渣进行 2 次浸提滤渣,合并滤液,减压浓缩得到较为纯净的原花青素。以提取量为评价指标进行评定。
4.提取时间对提取量的影响
采用提取时间为 1.0h、1.5h、2.0h、2.5h和3.0hn共 5个配比,按照上述三个单因素的最佳条件进行提取,抽滤后滤渣进行2次浸提滤渣,合并滤液,减压浓缩得到较为纯净的原花青素。 以提取量为评价指标进行评定。
二、花生油过氧化值的检测结果
图 1 反映的是未添加原花青素的空白组和添加 1%原花青素的对照组在时间作用下 POV 值的变化。 由该图可知,随着时间的增长,添加原花青素的花生油明显比未添加原花青素的花生油的 POV 值更低,说明其被氧化的程度更低;并且随着时间的延长,原花青素的抗氧化作用越来越明显。因此,原花青素对花生油有着一定的抗氧化作用。
三、结论
本试验是以松树皮为原料,采用盐酸 - 乙醇作为提取剂,以原花青素的提取量为评价指标,探索原花青素的最佳提取工艺。通过试验,得到最佳的提取工艺条件为:超声波作用时间为 20min,料液比为 1:
25,提取温度为 55℃,提取时间为 3h,在该工艺条件下原花青素的提取量可以达到 3.0mg/g。将原花青素用于花生油的抗氧化试验中发现,添加原花青素的油脂比起未添加的油脂明显被氧化的程度更低,说明原花青素对油脂有一定的抗氧化作用。
参考文献:
[1]张明,张相,罗书勒.天然抗氧化剂原花青素提取研究[J].精细与专用化学,2014.
[2]张晓丽.落叶松树皮原花青素的抗氧化性的结构的研究[J].食品工业科技,2013.
[3]隋勇.孙智达,谢笔钧.荔枝皮原花青素与 VC、VE 的协同抗氧剂研究[J].食品科学,2012.

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